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1. 简述Southern杂交的基本方法。Southern杂交在哪些方面有应用?

1、简述Southern杂交的基本方法。Southern杂交在哪些方面有应用?

Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是：具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则特异性地杂交形成双链。

【答案】：Southern杂交技术是一种核酸分子杂交技术，用于鉴定特定的重组DNA克隆。其基本原理为：（1）制备特定的DNA探针或RNA探针。探针是具有一定已知序列的核酸片段，探针与被探测的DNA对象即目的基因具有互补的序列，带有放射性的或荧光的探测标记。

将预杂交液事先在65℃ 预热，然后将10 ml 预杂交液加入袋中，封口。（3）65℃预杂交1h 以上，不时摇动。5．杂交 （1）取出杂交袋，剪去一角去除杂交液后，加入5ml杂交液及5μl 变性探针，排除气泡后封口。（2）将杂交袋放入65℃ 水中杂交过夜。

如果探针与特定的DNA片段互补，就会结合在一起，形成杂交带。Southern杂交的作用主要体现在两个方面。Southern杂交可以用于DNA的定性分析，通过检测杂交带的存在与否，可以确定样本中是否存在特定的DNA序列。

分子杂交是通过各种方法将核酸分子固定在固相支持物上，然后用放射性标记的探针与被固定的分子杂交，经显影后显示出目的DNA或RNA分子所处的位置。根据被测定的对象，分子杂交基本可分为以下几大类：（1） Southern杂交：DNA片段经电泳分离后，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上，然后与探针杂交。

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